SNP筛查和鉴定——TaqMan法


SNP
筛查和鉴定——TaqMan


简介:
人类基因组中存在着广泛的多态性,最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代,即单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)。SNP的数量大、分布广,在组成人类基因组30亿个碱基中,平均每1000个就有一个SNPSNP作为第三代遗传标记,在复杂疾病的基因定位、关联分析、个体疾病易感性分析与药物基因组学的研究中发挥着愈来愈重要的作用。为适应日益增长的 SNP研究需求,和各类客户的不同需要,威斯腾生物中心利用多套技术方案为不同客户提供量身定做的个性化服务。


TaqMan
探针法:

 

特点:

1、先进的荧光检测技术:一束激光扫描并激活96个孔的每一个孔里的荧光染料,实现多色荧光同时检测。2、通量大,速度快,一批样本分析只需2个小时;

 

原理:

1、   聚合:在Taq Man探针的5'3'端分别连接一个荧光报告(R)染料和一个淬灭物(Q)正向引物探针反向引物

2、   链置:换当探针完整时,报告染料发射的荧光被淬灭

3、   裂解:在每一次延伸循环中,DNA多聚酶将探针上的报告染料裂解出来

4、   聚合完成:报告染料一旦与淬灭物分离即发出它特有的荧光

实验流程:

1DNA提取,设计引物并合成

2PCR

3、上机检测,数据采集以及分析


客户需知:

1、   准确的基因名称和序列以及SNP位点信息

2、   提供样品要:A、血液样品(至少4ml、需加EDTA);B、基因组DNA 样品,需-20度保存和运输

3、   纯度要求:OD260/2801.6~1.8之间;OD260/2301.8~2.2之间

4、   浓度要求( C) :基因组DNA浓度大于100ng/ul

5、   单个PCR反应量(M)50ng    

6、   DNA用量需求( UL):PCR反应个数(N* M/ C


结果提供:

1、   提供电子版结果及实验流程

2、   提供数据分析服务

3、   实验数据及实验剩余的样品和引物为客户所有


实验费用:

1DNA提取费用

2、引物设计及合成费用

3PCR扩增费用

4、上机费用

5、数据分析费用


威斯腾实验服务流程




威斯腾实验服务项目




【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养

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