Cas9多基因敲除细胞系

CRISPR /Cas9多基因敲除细胞系

 

产品介绍

稳定细胞系在重组蛋白制备、抗体制备、药物筛选、基因功能研究及其它方面起着重要作用。稳定细胞系能持续生长,并持续稳定表达外来基因。根据研究或应用方向,可通过改变插入的拷贝数及启动子活性,调控外源基因在靶细胞的表达水平,使其升高、降低、或与靶细胞内源基因表达量相等。外源基因的插入方式可分为随机插入,或插入定点位置。

威斯腾生物现为广大研究者提供稳定细胞系构建服务,使用最先进技术水平,为您提供高质量的稳定细胞系。构建服务可使用复能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具细胞,也可使用客户指定的特定细胞系。从克隆构建、细胞系建立、基因扩增、单克隆筛选、细胞系鉴定、到功能研究,全方位的实验选择可满足研究者对蛋白表达、基因沉默等多种科研需求。
选择威斯腾生物的哺乳动物稳定细胞系构建服务,您可以: 

1)自由选择基因插入方式

2)自由选择克隆载体

3)自由选择靶细胞系

4)自由选择扩增基因或调整蛋白表达量


基因敲除技术一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯腾生物利用最新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲除。

我们利用该技术,定点敲除各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选,利用CRISPR/Cas系统获得的基因敲除细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAi和shRNA介导的基因敲落。


技术特色

1. 可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲除
2. 最新Nickase酶/双gRNA技术,显著降低脱靶率
3. 无种属限制,适用于各种细胞系的靶向敲除


操作流程

靶向目标序列sgRNA的设计及载体构建

目标细胞系共转染

阳性细胞株的筛选和鉴定


参考细胞系

肿瘤细胞系: BEL-7402人肝癌细胞  CNE人鼻咽癌细胞  Hela人宫颈癌细胞  MCF-7人乳腺癌细胞等

神经细胞系:SK-N-SH人神经母瘤细胞

卵巢细胞系:SK-OV-3人卵巢癌细胞

血管平滑肌细胞系:VSMC血管平滑肌

成纤维细胞系:包皮成纤维细胞,心肌成纤维细胞

肺细胞系:SK-MES-1人肺鳞癌细胞  NCI-H460人大细胞肺癌细胞 A549人非小细胞肺癌细胞

肾细胞系:NRK肾小球足细胞

巨噬细胞:MH-S小鼠肺泡巨噬细胞  RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞  THP-1人单核巨噬细胞

内皮细胞:HUVEC人脐静脉内皮细胞

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具体CRISPR /Cas9细胞建系技术定制服务,欢迎联系我们。


威斯腾实验服务流程



威斯腾生物服务项目

分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型
SLAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代细胞培养肝纤维化模型
细胞