大鼠颅脑损伤/MCAO模型

大鼠颅脑损伤/MCAO模型

 

人类疾病的动物模型在医学科学研究方面占有十分重要的地位。威斯腾生物动物中心经过十余年的发展,累积了丰富的动物培养和模型构建经验,在动物模型构建方法上摸索出独有经验,常规动物模型构建平均成功率98%以上,重难点模型(开胸/开颅术等)构建平均成功率75%以上,形成了高效高质量的动物模型构建方法库,可成功构建上百种疾病动物模型。


大鼠MCAO模型构建

动物适应性喂养

动物自购回后保持动物房12h-12h昼夜交替,保持动物自由饮水、进食,温度23-25℃,适应性喂养一周后进入实验。

大鼠MCAO模型构建

参照改良Zea Longa线栓法构建大鼠MCAO模型。大鼠术前12h禁食不禁水。

大鼠称重,7%水合氯醛(0.5ml/100g)腹腔注射麻醉,颈前部备皮、消毒,行颈正中切口,钝性分离右侧皮下组织及肌肉暴露出颈总动脉,眼科镊小心分离伴行于颈总动脉的迷走神经及动脉周围粘膜组织,分离出颈总动脉大约1~1.5cm。继续向头部分离,小心剔除覆盖于动脉上方的粘膜组织,可见颈外动脉、颈内动脉与颈总动脉呈“Y字形”分布,游离出独立的颈内、外动脉。结扎颈外动脉及颈总动脉近心端,颈内动脉埋线并用动脉夹暂时夹闭。在颈总动脉近心端结扎处剪一“V”形切口,用眼科镊夹持栓线由颈总动脉进入颈内动脉,到达动脉夹时,将埋线稍微拉紧(防止渗血),松开动脉夹,继续插入栓线,当特制栓线黑色标记处到达Y字形分叉口附近时,此时栓线已进入大脑中动脉且不能继续前行。

栓线插入完毕后,将预留的结扎线拉紧固定。医用棉签清理颈部血块,缝合皮肤,酒精棉球消毒,将大鼠放回笼子。90min过后,麻醉大鼠,颈部消毒,打开一个小口,用眼科镊夹住栓线固定处将栓线拔出约1cm实现血流再灌注,剪去多余栓线,逐层缝合。


注意事项:

1)分离颈部肌肉时,两侧小块肌肉叫鼓泡腺体(很多人误认为是甲状腺),避免损伤导致出血。
2)见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经,若损伤则可能影响其呼吸而死亡的。
3)分离血管时,要尽量将血管剥离的干净些,这样在用眼科剪剪口时就不会误剪外膜,且要剪一个斜行的切口。
4)系牢拴线绕在 CCA 远心端的细线时注意掌握力度,不可不扎,否则出血较多,但不可过紧,否则插线困难
5)线栓是分几次一点点插进去的,而不是夹住线栓的中间部分一下子插进去的,直到遇到轻微阻力停止插线。

 

SD大鼠颅脑损伤模型(Feeney 自由落体法

实验鼠称重,7%水合氯醛麻醉(5ml/kg),头部备皮,俯卧固定于颅脑损伤仪上。手术区酒精棉球消毒,将大鼠头顶部皮肤矢状切开,剥离筋膜。以人字缝前3mm、冠状缝右侧3mm为圆心用颅骨钻钻孔并扩大骨窗(直径5mm),钻孔过程需注意不能损坏硬脑膜,将致伤撞垫轻轻置于骨窗中央的硬脑膜上,用40g的砝码自20cm高处沿滑杆自由落体落下打击撞垫(冲击力为800g·cm),造成大鼠右顶叶局限性脑挫裂伤。骨蜡封窗,缝合头皮。

 

威斯腾实验服务流程



威斯腾生物服务项目

分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型
SLAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代细胞培养肝纤维化模型
细胞因子芯片骨髓间充质干细胞培养胆结石模型
BioPlex悬浮芯片脂肪干细胞培养急性胰腺炎模型
生长因子芯片心肌成纤维细胞培养急性肾衰竭模型
炎症因子芯片软骨细胞培养体内血栓模型
血管生成因子芯片血管内皮细胞培养关节炎模型
凋亡因子芯片神经元细胞培养I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片内皮组细胞原代培养裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片基因编辑动物
电生理相关服务动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测高通量测序代谢组学
细胞原代培养mRNA测序气相色谱GC/MS
MTT检测LncRNA测序液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测全基因组测序核磁共震NMR
细胞周期检测RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验外显子测序影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭16s扩增子测序Micro-CT
流式分选Small RNA测序小动物活体成像
CCK8/XTT检测宏基因组测序核磁共振
台盼蓝检测细胞活性单细胞测序PET-CT
药物筛选细胞学实验circleRNA测序
细胞粘附性检测甲基化测序基因编辑动物
细胞划痕实验条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入基因芯片
扫描电镜基因定点突变细胞系LncRNA芯片
透射电镜单基因敲除细胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除细胞系mRNA芯片
免疫组化目的基因敲入细胞系甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测报告基因敲入细胞系SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色CRISPR/Cas9动物敲除/敲入科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交基因敲除大鼠/小鼠科研文献论著翻译
荧光原位杂交基因敲入大鼠/小鼠论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等)临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测药物筛选服务项目药效学评价
旷场实验高通量自动药物筛选平台抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测细胞高内涵药物筛选平台心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测蛋白质组学靶标研发平台泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳分子药理研究平台内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选


【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务! 
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